最近，中国科学技术大学的研究团队，包括尤业字、洪春雁、王龙海、肖峻和陈光共同发表了一篇题为“自噬体原位包被纳米点作为个性化癌症疫苗”的研究论文，刊登在《Nature Nanotechnology》（影響因子=381）上。该研究中，研究人员首先合成了具有特殊结合能力的功能性Ti2NX纳米点，这些纳米点能够有效捕获和包裹自噬体，形成稳定的纳米点包被自噬体（NCAP）。通过免疫荧光和透射电子显微镜观察，发现NCAP与溶酶体或多泡体（MVBs）的融合被成功阻断，从而促使NCAP蓄积，引发细胞焦亡和膜破裂，最终使得NCAP逸出，这一过程使研究人员能够简便地制备NCAP疫苗。

进一步地，作者通过体外实验和小鼠癌症模型验证了NCAP能够激活免疫细胞并引发有效的免疫反应，有效清除原发性和远端肿瘤，为个体提供长期的免疫监视保护。这一研究为肿瘤治疗开辟了一种前景广阔的新策略。研究中使用了由汉恒生物提供的自噬双标腺病毒（HBAD-mRFP-EGFP-LC3）以判断自噬体及自噬溶酶体的生成。

根据研究成果，Ti2NX纳米点能够有效捕获和包裹自噬体，从而产生稳定的NCAP。研究者通过对多层Ti2AIN进行逐层蚀刻和剥离，成功制备直径约为3nm的功能性Ti2NX纳米点，这些纳米点拥有独特的PI4P结合能力。为确认Ti2NX纳米点处理后是否能够阻断自噬体与溶酶体的融合，研究小组将自噬双标腺病毒转染入癌细胞，并发现与对照组相比，在Ti2NX纳米点处理后，细胞中出现了明显更多的黄色斑点，同时红色斑点的数目减少，表明Ti2NX有效阻断了自噬体和溶酶体的融合。

研究还表明，Ti2NX纳米点处理显著减少了自噬体与溶酶体的融合，使得这些自噬体能够逃离肿瘤细胞。透射电子显微镜的观察结果显示，大多数NCAP成功逸出细胞外。通常情况下，自噬体难以从肿瘤细胞中逸出，但为了有效作为癌症疫苗，其必须具备这样的能力。由于自噬体的融合被阻断，内部物质无法被降解或排出细胞，进而增加了细胞内的应激水平。进一步的Western Blot分析结果显示，Ti2NX纳米点能够激活NLRP3炎症小体，诱发细胞焦亡，最终导致细胞膜破裂，进而让NCAP顺利从细胞中释放出来。

研究团队还表明，NCAP在淋巴结中的积累和免疫细胞的激活对于后续的免疫应答至关重要。为此，研究者采用了体外同种异体干细胞制备NCAP疫苗，通过CFDA荧光标记后评估Allo-NCAP疫苗在淋巴结的浸润情况，发现经过皮下注射后，淋巴结内仍观察到强烈的荧光信号，而主要器官内几乎没有荧光。通过流式细胞术评估，Allo-NCAP进入树突状细胞的能力显著高于传统的自噬体疫苗。

针对研究的补充，作者还研发了自体NCAP疫苗（Self-NCAP），其通过直接注射Ti2NX纳米点到小鼠肿瘤内形成。后续的评估显示Self-NCAP的抗肿瘤能力明显优于传统自噬体疫苗。尤其是在双侧肿瘤模型中，Self-NCAP不仅能够消除原发肿瘤，还能减小远端肿瘤的体积。而在免疫细胞活性的研究中，Self-NCAP还显著提高了IFN-γ+CD8+T细胞的比例，为临床肿瘤治疗提供了新的思路。

最后，研究表明，Self-NCAP激活的免疫反应具有肿瘤特异性，且能发展为长期的免疫记忆，提供持久保护。实验结果显示，Self-NCAP成功逆转了肿瘤免疫抑制微环境，显著提高了CD8+和CD4+T细胞的浸润。该研究利用功能性ag尊龙凯时纳米点在肿瘤内原位生成个性化自噬体癌症疫苗的方法，为癌症根治提供了一条新的研究途径，显示出极佳的临床应用前景。