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人单核细胞白血病THP-1细胞培养指南 - ag尊龙凯时

来源:梅凤珠 日期:2025-02-15

ag尊龙凯时提供的人单核细胞白血病细胞THP-1具有以下生长特性:细胞呈悬浮状态,形态为圆形。其冻存条件为无血清冻存液,适合的培养体系为1640培养基加10%胎牛血清(FBS)、0.05 mM β-巯基乙醇和1%的双抗。建议初次传代比例为1:2,并在每2~3天更换培养液。

人单核细胞白血病THP-1细胞培养指南 - ag尊龙凯时

细胞培养指导

在处理细胞培养时,建议按照以下步骤进行操作:

细胞处理流程

收到细胞后,建议用75%酒精对细胞瓶进行消毒,随后在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时,以帮助细胞稳定。观察细胞生长情况,并进行显微镜拍照(建议拍摄40x、100x、200x倍率各一张)。前三天的照片可作为售后服务的重要依据,若未提供照片将默认细胞状态良好。

细胞传代步骤

1. 如果细胞汇合度未超过80%,请将培养液收集至离心管,保留5ml完全培养基,并置于37℃、5% CO2的孵箱中培养。

2. 若细胞密度超过80%,可以进行传代。以下是两种悬浮细胞传代的方法:
方法一:将细胞收集后以1000 RPM离心8-10分钟,弃去上清液,加入1-2ml培养液轻轻混匀,最后按1:2到1:5的比例分配到新的含8ml培养基的培养皿或瓶中。
方法二:采用半数换液的方法,弃去半数培养基后,将剩余的细胞悬起,按1:2到1:3的比例分至新的含8ml培养基的培养皿或瓶中。

细胞冻存及复苏

1. 当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,将悬液收集至离心管中,1000 RPM离心5分钟后弃去上清,加1ml雅吉生物无血清冻存液混匀后放入冻存管中;
2. 冻存细胞应直接放入-80℃冰箱,若需要转入液氮罐,需先在-80℃冰箱中存放超过24小时。

复苏步骤包括将冻存管在37℃水浴中迅速解冻,用酒精擦拭后将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管中进行离心,重悬后接种至T25培养瓶中继续培养。

售后服务注意事项

ag尊龙凯时为您提供保障,如遇细胞问题,以下情况可申请重发:
1. 运输途中细胞丢失、瓶身破损或培养液严重漏液;
2. 收到48小时内出现污染,需提供实验结果以供核实;
3. 常温或干冰运输的细胞复苏后活性不佳,需提供细胞状态照片;
4. 细胞活性问题需在7天内反馈,并使用台盼蓝法鉴定细胞活力。

不予重发的情况包括客户引起的污染、操作不当以及未提供相关照片等。

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