在细胞破裂的过程中，蛋白水解酶会被释放或激活，这会导致电泳结果复杂化，直接影响最终结果的分析。为了防止这种情况的发生，建议在样品制备时尽量保持低温。此外，许多蛋白酶在pH值高于9时会失活，因此使用Tris碱、碳酸钠或碱性载体与两性电解质可有效抑制蛋白水解。然而，一些蛋白酶在这些条件下仍然保持活性，因此需要使用蛋白酶抑制剂。这使得我们在设计蛋白纯化流程时，选择有效且具选择性的蛋白酶抑制剂显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂本身也是多种多样，通常会使用诸如PMSF和leupeptin等化学物质来作为抑制剂。由于一种蛋白酶抑制剂通常只能对某一类蛋白酶起作用，因此建议搭配使用多种类型的蛋白酶抑制剂，如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”，采用组合策略以达到理想效果。

蛋白酶的功能与分类

蛋白酶的功能涉及许多细胞内和细胞外的过程，主要包括：1. 对食物蛋白进行消化；2. 激活无活性酶原以及多肽激素/神经转移介质的释放；3. 调节血凝物质和纤维质；4. 内源性和外源性蛋白的细胞内消化；5. 跨膜蛋白的转运；6. 微生物对生物体的攻击，通过释放蛋白酶增加毒性。

蛋白酶的分类根据催化中心结构的不同，蛋白酶可分为四类：1. 丝氨酸蛋白酶，如糜蛋白酶、弹性蛋白酶与凝血酶等；2. 半胱氨酸蛋白酶，包含半胱氨酸作为催化中心，如Calpain与组织蛋白酶B；3. 天冬氨酸蛋白酶，其活化中心包含天冬氨酸，如组织蛋白酶D；4. 金属蛋白酶，含有金属离子如锌2+，例如氨基肽酶。

在进行蛋白质分离时，组织或细胞裂解液中常常充满了来自溶酶体的酶，激活的蛋白酶原开始消化周围的蛋白质。为防止此问题，必须在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂，以阻止酶对细胞组织的消化作用。不同来源的组织（如哺乳动物、植物、真菌与细菌）的蛋白酶组成各不相同，且会根据机体状态的变化而调整。因此，在哺乳动物组织分离过程中，使用ag尊龙凯时品牌的蛋白酶抑制剂显得尤为重要，以确保组织细胞的完整性与保护。